18017847121
當(dāng)前位置：首頁(yè) > 產(chǎn)品中心 > 實(shí)驗(yàn) > 細(xì)胞實(shí)驗(yàn) > 質(zhì)粒轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)
簡(jiǎn)要描述：質(zhì)粒轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)：轉(zhuǎn)染（transfection）是真核細(xì)胞主動(dòng)或被動(dòng)導(dǎo)入外源DNA的片段而獲得新的表型的過(guò)程。
更新時(shí)間：2022-12-23瀏覽次數(shù)：946詳細(xì)介紹
常規(guī)轉(zhuǎn)染技術(shù)可分為兩大類，一類是瞬時(shí)轉(zhuǎn)染，一類是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色體中，因此一個(gè)宿主細(xì)胞中可存在多個(gè)拷貝數(shù)，產(chǎn)生高水平的表達(dá)，但通常只持續(xù)幾天，多用于啟動(dòng)子和其它調(diào)控元件的分析。一般來(lái)說(shuō)，超螺旋質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染效率較高，在轉(zhuǎn)染后24-72小時(shí)內(nèi)（依賴于各種不同的構(gòu)建）分析結(jié)果，常常用到一些報(bào)告系統(tǒng)如熒光蛋白，β半乳糖苷酶等來(lái)幫助檢測(cè)。后者也稱穩(wěn)定轉(zhuǎn)染，外源DNA既可以整合到宿主染色體中，也可能作為一種游離體（episome）存在。盡管線性DNA比超螺旋DNA轉(zhuǎn)入量低但整合率高。外源DNA整合到染色體中概率很小，大約1/104轉(zhuǎn)染細(xì)胞能整合，通常需要通過(guò)一些選擇性標(biāo)記，如來(lái)氨丙基轉(zhuǎn)移酶（APH；新霉素抗性基因），潮霉素B磷酸轉(zhuǎn)移酶（HPH），胸苷激酶（TK）等反復(fù)篩選，得到穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的同源細(xì)胞系。
轉(zhuǎn)染技術(shù)的選擇對(duì)轉(zhuǎn)染結(jié)果影響也很大，許多轉(zhuǎn)染方法需要優(yōu)化DNA與轉(zhuǎn)染試劑比例，細(xì)胞數(shù)量，培養(yǎng)及檢測(cè)時(shí)間等。
產(chǎn)品咨詢
聯(lián)系人：張
地址：上海市長(zhǎng)江南路180號(hào)長(zhǎng)江軟件園B區(qū)B637室
郵箱：2844970554@qq.com
傳真：歡迎您關(guān)注我們的微信公眾號(hào)了解更多信息
掃一掃
歡迎來(lái)到