流式雙標(biāo)實(shí)驗(yàn)

簡(jiǎn)要描述：流式雙標(biāo)實(shí)驗(yàn)：是達(dá)為科生物細(xì)胞平臺(tái)較為成熟的實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)之一，由本公司經(jīng)驗(yàn)豐富的實(shí)驗(yàn)人員操作完成。

更新時(shí)間：2022-12-23
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實(shí)驗(yàn)

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詳細(xì)介紹

準(zhǔn)備單細(xì)胞懸液：淋巴組織、骨髓、血液或培養(yǎng)的細(xì)胞。
用冰染色緩沖液洗細(xì)胞2次，離心細(xì)胞，用冰染色緩沖液重懸細(xì)胞，使終濃度為2×107細(xì)胞/ml。
各取50ul（106細(xì)胞）細(xì)胞懸液到2個(gè)圓底的Ep管中。
根據(jù)抗體說(shuō)明書(shū)在其中1個(gè)Ep管中加入合適的抗體量，另外1個(gè)加入同型對(duì)照抗體，冰上避光孵育20分鐘（建議每5分鐘輕輕混勻，以免細(xì)胞沉積）。根據(jù)熒光抗體的親和力適當(dāng)延長(zhǎng)染色時(shí)間。
用1ml染色緩沖液洗2次去除未結(jié)合的抗體，300×g離心5分鐘，每次離心后小心吸取上清。
用適量染色緩沖液（如500ul）重懸細(xì)胞。
流式細(xì)胞儀分析染色結(jié)果（不超過(guò)4小時(shí)）。如果暫時(shí)無(wú)法檢測(cè)，也可以將染色后的細(xì)胞用4%多聚甲醛固定后，避光儲(chǔ)存在4度。固定后的細(xì)胞可以保存多一個(gè)星期。

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