材料：

      6孔板

      marker筆

      直尺

      20微升槍頭（滅菌）

      無(wú)血清培養(yǎng)基

      PBS

準(zhǔn)備：

      所有能滅菌的器械都要滅菌，直尺和marker筆在操作前紫外照射30min（超凈臺(tái)內(nèi)）

流程：

      1、先用marker筆在6孔板背后，用直尺比著，均勻地劃?rùn)M線(xiàn)，大約每隔0.5~1cm一道，橫穿過(guò)孔。每孔至少穿過(guò)5條線(xiàn)。

      2、在空中加入約5X105個(gè)細(xì)胞，具體數(shù)量因細(xì)胞不同而不同，掌握為過(guò)夜能鋪滿(mǎn)。

      3、第二天用槍頭比著直尺，盡量垂直于背后的橫線(xiàn)劃痕，槍頭要垂直，不要傾斜。

      4、用PBS洗細(xì)胞3次，去除劃下的細(xì)胞，加入無(wú)血清培養(yǎng)基。

      5、放入37℃5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。按0、6、12、24小時(shí)取樣，拍照。